راه اندازی روش لکه گذاری نقطه ای معکوس (reverse dot blot) برای تعیین تیپ آلل های گروه hla drb*۰۱

نویسندگان

مجید صفا

majid safa مهدی فروزنده مقدم

mahdi forouzande moghadam علی اکبر پورفتح اله

aliakbar pourfatollah حبیب نصیری

habib nasiri محمدجواد رسایی

چکیده

مقدمه و هدف : شناخت گروه های آللی و آلل های اختصاصی موجود در افراد پیامدهای مهمی را در پیوند عضو و سلول بنیادی و در مطالعات مرتبط با بیماری ها به دنبال دارد. کاربرد تعیین تیپ آنتی ژن های لکوسیت انسانی به روش مولکولی در پیوند عضو، کیفیت بهتری را در این امر ایجاد می کند و به تعیین سازگاری دقیق تر با نتایج بالینی بهتر منجر می شود. در این مطالعه تکنیک هیبریداسیون نقطه ای معکوس به عنوان یک روش ساده و سریع برای تشخیص آلل های گروه hla-drb1*01 راه اندازی شد.   مواد و روش ها: ما به منظور تعیین تیپ آللی hla-drb1*01 با قدرت تفکیک بالا، آلل های این گروه را با استفاده از پرایمرهای اختصاصی گروه آللی تکثیر کردیم. تکثیر dna در صورتی رخ می دهد که آللی به صورت کاملاً مکمل با دو پرایمر انتخاب شده در dna ژنومی وجود داشته باشد. این تکنیک اغلب منسوب به pcr-ssp است. سپس برای تشخیص اختصاصی این آلل ها ( hla-drb1*0101,0102,0103,0104 )، محصولات pcr نشاندار شده با بیوتین (با استفاده از پرایمرهای نشاندار با بیوتین) با پروب هایی که در انتهای َ5 دارای گروه آمین بودند بر روی غشاء کربوکسیله شده هیبرید شدند. حضور محصولات pcr هیبرید شده با پروب اختصاصی، به وسیله استرپتواویدینکونژوگه با آلکالین فسفاتاز و سوبسترای nbt/bcip ردیابی می شود.   نتایج: حضور هر کدام از آلل های اختصاصی به وسیله ظهور یک لکه روی غشاء شناسایی شد. نتایج به دست آمده حاصل از این تکنیک با روش های دیگر همخوانی داشت.   نتیجه گیری: نتایج ما پیشنهاد می کند که تکنیک rdb برای تعیین تیپ hla ، یک روش سریع و حساس با دقت زیاد است و برای موارد استفاده بالینی مناسب است.

برای دانلود باید عضویت طلایی داشته باشید

برای دانلود متن کامل این مقاله و بیش از 32 میلیون مقاله دیگر ابتدا ثبت نام کنید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

راه اندازی روش Real-time PCR بر پایهgreen SYBRجهت تعیین الل‌های HLA-DQ در بیماران مبتلا به سیلیاک

  سابقه و هدف: از عوامل ژنتیکی مهم در ابتلا به بیماری سیلیاک، حضور الل‌های HLA-DQ2 و HLA-DQ8 در افراد مبتلا می‌باشد. روش‌های مولکولی زیادی جهت تعیین این الل‌ها در دسترس می‌باشد اما این روش‌ها علاوه بر هزینه بالا، دارای مراحل متعددی هستند که استفاده از آن‌ها را دشوار کرده است، لذا هدف از این مطالعه، راه‌اندازی تکنیک ساده و سریع جهت تعیین الل‌های HLA-DQ در بیماران مبتلا به سیلیاک با روش SYBR g re...

متن کامل

Detection of Zika virus using reverse-transcription LAMP coupled with reverse dot blot analysis in saliva

In recent years, there have been increasing numbers of infectious disease outbreaks that spread rapidly to population centers resulting from global travel, population vulnerabilities, environmental factors, and ecological disasters such as floods and earthquakes. Some examples of the recent outbreaks are the Ebola epidemic in West Africa, Middle East respiratory syndrome coronavirus (MERS-Co) i...

متن کامل

راه اندازی (Dot-Immunoassay (DIA (الایزای نقطه ای) و مقایسه آن با ممانعت از هماگلوتیناسیون (HI) و الایزا (ELISA) در تشخیص سرخک

سابقه و هدف: سرخک بیماری حاد و مسری در انسان است، که طبق برآورد سازمان بهداشت جهانی (WHO) تا سال 2010 احتمالا ریشه کن خواهد شد. تشخیص سرخک با استفاده از سنجش های سریع و حساس برای پیشگیری و کنترل انتشار بیماری از اهمیت ویژه ای برخوردار می باشد. مواد و روش ها: روش های متعددی برای شناسایی آنتی بادی علیه ویروس سرخک بکار گرفته می شود، از جمله ممانعت از هماگلوتیناسیون (HI)، آنزیم ایمونواسی (EIA)، کاه...

متن کامل

ارزیابی میزان تغییرات بیان ژن های خانه دار در برهمکنش گندم با بیمارگر Mycosphaerella graminicola با روش Reverse northern dot blot

به‎طور کلی ژن‌های مرجع در تجزیه و تحلیل‎های بیان ژن، از بین ژن‌های خانه‌دار انتخاب می‌شوند، اما تغییرات دیده شده در مقدار بیان مانع اساسی برای استفاده بهینه از آن‌هاست. از آنجا که بیان هیچ تک ژنی در شرایط مختلف و سلول‌های متفاوت ثابت نیست، معرفی و اعتبارسنجی ژن‌های مرجع بسیار مهم است. در این تحقیق مناسب بودن هفت ژن خانه‌دار گندم برای نرمال‌سازی بیان mRNA در برگ این گیاه در هنگام آلودگی به قارچ ...

متن کامل

ارزیابی میزان تغییرات بیان ژن های خانه دار در برهمکنش گندم با بیمارگر Mycosphaerella graminicola با روش Reverse northern dot blot

به‎طور کلی ژن‌های مرجع در تجزیه و تحلیل‎های بیان ژن، از بین ژن‌های خانه‌دار انتخاب می‌شوند، اما تغییرات دیده شده در مقدار بیان مانع اساسی برای استفاده بهینه از آن‌هاست. از آنجا که بیان هیچ تک ژنی در شرایط مختلف و سلول‌های متفاوت ثابت نیست، معرفی و اعتبارسنجی ژن‌های مرجع بسیار مهم است. در این تحقیق مناسب بودن هفت ژن خانه‌دار گندم برای نرمال‌سازی بیان mRNA در برگ این گیاه در هنگام آلودگی به قارچ ...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید


عنوان ژورنال:
دانشور پزشکی

جلد ۱۶، شماره ۷۹، صفحات ۴۵-۵۰

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023